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抗性淀粉檢測(cè)對(duì)人健康的益處

更新時(shí)間:2017-03-19點(diǎn)擊次數(shù):2575
抗性淀粉檢測(cè)對(duì)人健康的益處
 
抗性淀粉可以影響人和動(dòng)物日糧中各種養(yǎng)分的消化與吸收,對(duì)人的健康有利。在延緩糖尿病人餐后血糖上升、肥胖控制、預(yù)防腸道疾病、降低血中膽固醇和能量消化率等具有重要的生理功能。
 
抗性淀粉檢測(cè)原理(AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40)
樣品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時(shí),在這期間,通過(guò)兩種酶的聯(lián)合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結(jié)束后,加入等體積的乙醇或工業(yè)甲基化酒精(IMS,變性乙醇)終止反應(yīng)。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團(tuán)即為樣品中的RS,用含水的IMS或乙醇(50%v/v)洗滌絮狀團(tuán),洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團(tuán)置于冰水浴中,加入2M KOH溶解,溶解的同時(shí)用磁力攪拌機(jī)劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將這個(gè)溶液調(diào)至中性,用AMG將淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過(guò)氧化物酶試劑(GOPOD)測(cè)定,這也是對(duì)樣品中RS含量的測(cè)定。非抗性淀粉(可溶性淀粉)的測(cè)定可通過(guò)集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測(cè)定D-葡萄糖完成。
 
抗性淀粉檢測(cè)含量的方法,其步驟如下:    
①.取樣:稱取95-105mg樣品于離心試管中;    
②.*次酶解反應(yīng):加胰α-淀粉酶反應(yīng)液3.8-4.5ml,放入35-40℃的水浴恒溫振蕩器中水解,15-17小時(shí)后取出,加入3.8-4.2ml乙醇旋渦混勻,以2800-3100rpm的速度離心11-14分鐘,棄上清液,再加入7-13ml乙醇,旋渦混勻,仍然以2800-3100rpm的速度離心10-13分鐘,棄上清液;    
③.溶解抗性淀粉:向離心管中加入1.8-2.5ml氫氧化鉀溶液,冰浴振蕩16-21分鐘,再加7.8-9ml醋酸鈉緩沖溶液,搖勻;    
④.第二次酶解反應(yīng):加入淀粉葡萄糖苷酶液200-350U/ml,放入48-55℃水浴恒溫振蕩器中,26-31分鐘后取出; 
⑤.測(cè)定:離心后,吸取100μl上清液于生化分析儀中測(cè)定葡萄糖,計(jì)算出抗性淀粉含量。
 
 
 
 
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